动物实验日常----肝癌动物模型的构建

主要选择啮齿类动物，其中大鼠、小鼠是主要的实验动物。

一、Hepal-6细胞诱发C57BU76J小鼠原位肝癌模型

造模方法：小鼠肝脏内注射10⁶个Hepal-6细胞，在注射后10天用高频超声观察肝脏接种部位并记录，然后将其处死，取肝组织，进行肝组织病理学检查。

模型特点：Hepal-6细胞悬液注射到C57BL／6J小鼠肝内后可使小鼠体内直接成肿瘤，这种方法不需要先期的体

内适应过程，而且C57B肌J小鼠具有顽强的抵抗力，容易饲养，也不需要特殊的环境，具有操作简单、建模周期短、成功率高的特点。

采用Hep_G2细胞株建立裸鼠肝癌模型

造模方法：皮下注射Hep_G2细胞(1.2×10⁶)，种植细胞14d后，活体处死小鼠测定瘤体直径、重量及血清AFP浓度并进行病理学观察。

模型特点：省去反复对癌细胞体内外交替培养的复杂过程．周期短，成功率很高，达100％。

二、不同诱癌剂的诱癌方法

1、二乙基亚硝胺（diethylnitrosamine，DEN）诱发大鼠肝癌模型

造模方法：用 0.25% DEN水溶液按10mg/kg体重灌胃每周一次，其余时间 0.025% DEN水溶液由其自由饮用, 4周后, 停饮含DEN水而改饮灭菌自来水4周，使大鼠肝细胞损伤修复和代偿增生。在损伤修复中损伤DNA误配修复和微卫星不稳定导致基因突变加剧，继而在DEN诱癌过程中加速癌变，减少肝功能损伤而促进肝硬化及癌变。至18周末，诱癌成功率达。

模型特点：造模过程中以低浓度DEN通过自然饮水，诱发的大鼠肝癌接近自然过程，而且采用单一致癌剂，免受其他致癌因子的影响，有利于对病变的观察和分析。

2、黄曲霉素 B1(AflatoxinB1，AFB1) 诱发大鼠肝癌模型

造模方法：将AFB1添加到饲料中定量食用，用含 AFB1 4～5μg饲料连续饲养大鼠 6周，90天左右诱癌率达。

模型特点：该方法投药剂量小，给药时间短，癌灶形成较早；癌前病变的肝细胞增生以透明细胞灶多见，伴发肝硬化程度较 DEN诱发的肝硬化程度轻，形成时间较晚。此种方法与人体肿瘤发生病因学较为近似，故此

类模型常用于肿瘤特点的研究。